25
Flüoresent mikroskopiya (FM), kvars-halogen lampalarını və ya yüksək təzyiqli civə buxar
lampalarını adətən istifadə etməklə, böyük iş yükü olan regional və referens laboratoriyalarda
istifadə edilməsi üçün yararlıdır. Yaxmanın daha böyük hissəsinin görünməsinə və beləliklə də
yüksək həssaslığa, daha çevik yaxma yoxlamasına imkan verərək, toplama məqsədi ilə istifadə
edilə bilər. Lakin, kapital xərci və istifadə məsrəfləri SN mikroskopiyası ilə müqayisədə xeyli
yüksəkdir və nəticələri etibarlı oxumaq üçün daha çox ekspertiza tələb olunur. LED-lər
həmçinin UV işığı buraxmır və alətin enerji istehlakını əhəmiyyətli dərəcədə aşağı salır və
bununla da batareyanın uzun müddətli fəaliyyətinə imkan yaradır. Problemlər sırasına səhra
şəraitlərində reagentlərin qeyri-sabitliyi və uzun saxlamada boyalı yaxmaların qeyri-sabitliyi
daxildir. Orqanizmin turşuya davamlı təbiətini müəyyən etməyin metodlarından biri də turşuya
davamlı orqanizmlərin flüor sarıdan narıncıya döndərən flüorxrom (auriamin O, auramin-
radomin) prosedurlarıdır (istifadə edilən filtrdən asılı olaraq rəng müxtəlif ola bilər).
Auramin
əsas boya kimi istifadə edildikdə o mikolik turşuların hüceyrə divarlarını bağlayır. İntensiv
rəngsizləşdiricilər (güclü turşular, alkohol) hüceyrə divarının ilkin rəngini çıxartmır və
mikobakteriya aurmininin flüora çalan parlaq sarı rəngini qoruyub saxlayır. Arxa fonda
flüorsayağı rəngi boğmaq üçün kalium permanqanatdan, fimalin və evans abısından istifadə
edilir. Flüoressent mikroskopiya yaxmaların fuksin-əsası rəngləməsindən daha sürətli
mikroskopiya etməyə imkan verir və xüsusilə böyük həcmli müayinə materialı qəbul edən
laboratoriyalarda istifadə edilir. Bu həmçinin, az miqdarda basilli nümunələr üçün daha həssas
ola bilər, çünki bu metod daha az əmək sərf etməklə daha çox sahəni mikroskopiya etməyə
imkan verir. Lakin, bu metod sabit elektrik təchizatı, mikroskopu tənzimləmək və nəticələri
oxumaq sahəsində daha çox təcrübə, bahalı və qısa ömürlü lampaların müntəzəm şəkildə təchiz
edilməsini tələb edir. Halogen lampalarından istifadə edən daha ucuz sistemlərin az maliyyə
tələbləri olsa da onlar standart civə buxar lampaları istifadə edən sistemlərin keyfiyyətinə çata
bilmirlər. Yenicə yaradılmış fluor mikroskoplarına uyğunlaşdırılmış göy LED işıq mənbələri
yaxın gələcəkdə bu çətinlikləri dəf edə bilər. Çünki, onlar üçün 5 W lampa kifayətdir, onlar sadə
batareyalar ilə işləyə bilər və ən azı 10.000 saatlıq ömürləri vardır.
I və II sinif bioloji təhlükəsizlik kabinetlərindən istifadə və texniki xidmət
I sinif BTK, hava axını bir istiqamətdə operatordan daxilə doğru ventilyasiya olunan önü
açıq olan kabinetdir. İşlənmiş hava HEPA filtrdən sərthavaçıxarıcı ilə çıxarılır (Şəkil 1). HEPA
filtr 0.3 µm diameterli hissəciklərin 99.97%-ni və bundan böyük və ya kiçik hissəciklərin isə
99.9%-ni tutur. I sinif BTK işçini və ətraf mühitin müdafiəsini təmin edir, lakin materialı
(nümunə, ştam kulturaları) çirklənmədən qorumur. II sinif BTK, əlavə olaraq, materialın
(nümunə, kultura ştammları) çirklənmədən qorunmasını təmin edir: HEPA-filtrasiya olunmuş
havanın bir hissəsi laminar vertikal axınla kabinetin içinə geri qaytarılır və beləliklə bütün işçi
səthi boyunca təmiz hava “pərdəsi” salınır. Hər iki sinif BTK-lər istehsalçı şirkət mühəndisinin
(və ya onun təyin etdiyi mühəndisin) nəzarəti altında quraşdırılmalıdır.
Sertifikasiya ixtisaslı xidmət personalı tərəfindən, BTK servisə qoyulmazdan əvvəl və ondan
sonra da hər il aparılmalıdır. BTK, hər dəfə yeri dəyişdirildikdə, servisə verildikdə və ya təmir
olunduqda və HYST filtrlər dəyişdirildikdə təkrar sertifikasiya olunmalıdır. Təkrar sertifikasiya
kabinetin tamlığı, HYST filtr sızması, aşağı istiqamətli hava axını profili, öndə sürət, mənfi
təzyiq /ventilyasiya tezliyi, hava axını tüstü nümunəsi, həyəcan siqnalı və bloka düşmə testlərini
əhatə etməlidir. Həmçinin, əlavə olaraq, elektrik sızıntıları, işıqlanma intensivliyi, ultrabənövşəyi
işığın intensivliyi, küy səviyyəsi və vibrasiya üçün testlər aparıla bilər. Bu testlərin aparılması
26
üçün xüsusi hazırlıq, bacarıq və cihazlar tələb olunur və onların ixtisaslı mütəxəssis tərəfindən
həyata keçirilməsi artıq dərəcədə tövsiyə olunur.
Kultural müayinə
M. tuberkulosis kulturasının alınması və onun identifikasiyası vərəmin dəqiq diaqnozunu
verir. Mikroskopiyadan onun əsas üstünlüyü odur ki, o, daha az saylı çöpləri aşkarlaya bilir
(mikroskopiya üçün bəlğəmdə minimum 5000 çöp/ml müqayisədə təxminən 10 çöp/ml).
Beləliklə, kultural müayinə xəstəliyin erkən mərhələlələrində ekstrapulmonar vərəmin, müalicə
müvəffəqiyyətsizliklərinin, uşaqlarda vərəmin və aşağı çöp yükü olan İİV-müsbət pasiyentlərin
diaqnozunun potensialını artırır. Digər sözlə, kultural müayinədə aşkarlanma vərəm hallarının
sayını adətən 30-50% artırır.
Alınmış kulturadan həm nümunənin identifikasiyasını, həm də dərmana həssaslığını
müəyyən etmək mümkündür. Lakin, kultura mikroskopiya ilə müqayisədə xeyli bahalıdır,
texniki baxımdan çətindir, müasir laboratoriya avadanlığını, ixtisaslı kadrların olmasını və
adekvat biotəhlükəsizlik qaydalarının əməl olunmasını tələb edir.
Həm bərk, həm də maye kultural metodları Referens laboratoriyaları üçün münasibdir (və ya
böyük ölkələrdə regional laboratoriyalar). Kultural müayinə dərmanlara davamlılığın
yayılmasının müntəzəm icmalının aparılması üçün istifadə edilməlidir. Kultural müayinə
həmçinin dərmana davamlılıq olan pasiyentləri, təkrar xəstələnməni, müalicənin
müvəffəqiyyətsizliyi və xroniki halları axtararaq simptomatik olan yüksək risk qrupuna daxil
olan insanların, məsələn, laboratoriya işçilərinin mayinə edilməsi üçün istifadə edilə bilər.
Bərk kultural metod maye metodundan daha ucuzdur, amma nəticələr mikobakteriyaların
yavaş böyüməsi səbəbindən daima yubanır (6-8 həftəyədək). Maye kultural müayinə bərk
kultural müayinə ilə müqayisədə xəstəlik hallarının nəticələrini 10% artırır və həmçinin
nəticələrin yubanmasını həftələrdən günlərədək azaldır. Lakin, maye sistemləri çirklənməyə
meyillidir və böyük həcmdə infeksion materiallarla işləmə müvafiq biotəhlükəsizlik tədbirlərini
tələb edir.
Nümunələrin işlənməsi və vərəm kulturasının alınması
Dekontaminasiya/ konsentrasiya üsulları, qidalı mühitlərə inokulyasiyası
Mikobakterial kultura üçün təqdim olunan nümunələr iki cür olur: ağciyər mənşəli
nümunələr və qeyri-ağciyər mənşəli nümunələr. Ağciyər mənşəli nümunələr (məs. bəlğəm,
boğazdan götürülmüş maye, mədə yuyuntusu, bronxial yuyulma və fırçalama) demək olar ki,
həmişə normal rast gəlinən mikrofloraya bulaşmış olurlar. Bəzi qeyri-ağciyər mənşəli nümunələr
də bulaşmış ola bilər. Bunlar nümunə qidalı mühitə inokulyasiya edilməzdən əvvəl ləğv
edilməlidir. Bunu etmək üçün ədəbiyyatda bir neçə metod tətbiq edilir. Mikobakterial məhsulu
artırmaq üçün bulaşmış nümunələr durulaşdıran-dekontaminasiya və konsentrasiyaya ehtiyac
duyur. Bulaşmamış nümunələr bir qayda olaraq, durulaşdıran-dekontaminasiyası addımına
ehtiyac duymur, amma konsentrasiya tələb edə bilər.
Bəlğəmin ilkin işlənməsi
Sadə əkmə metodu istisna olmaqla, nümunələr sentrifuqa şüşələrində işlənməlidir. Əgər
bəlğəm standart konteynerlərə toplanıbsa, sentrifuqa şüşələrinə köçürülməlidir, bu da çarpaz-
kontaminasiya riskini və işarələmə xətalarını artırır. Buna görə də, kultivasiyaya nümunələrini
toplamaq üçün 50 ml-lik sentrifuqa şüşələrindən istifadə etmək praktik sayılır.
Dostları ilə paylaş: |