Mikroskoplar temelde iki kategoride incelenirler;
1.Işık Mikroskopları : Aydınlatma ışık dalgaları ile sağlanır. (ışık mikroskobu, karanlık alan
mikroskobu, faz-kontrast mikroskobu, Ultraviyole mikroskobu).
2. Elektron Mikroskobu: Aydınlatmanın elektronlarca gerçekleştirilir. (Transmission elektron
mikroskobu "TEM" ve Scanning elektron mikroskobu "SEM") [4].
IŞIK MİKROSKOPLARININ BAŞLICA KISIMLARI
Mikroskop iki ana kısımdan oluşur: 1. Mekanik Kısımlar
2. Optik Kısımlar
Şekil 5. Mikroskobun başlıca kısımları
(
http://www.microscopyu.com/galleries/
)
1.Mekanik kısımlar
a. Mikroskop tüpü:
Mikroskop tüpü mikroskobun göz ile baktığımızda görüntünün oluşması için gerekli olan
mercek sistemini taşıyan uzatıcı bir tüptür. Tüpün her iki ucunda iki grup büyütücü mercek
sistemi bulunur. Bunlar; incelenen örneğe yakın konumda olan objektif mercekleri
ile mikroskobun üst kısmında bulunan göze yakın olan oküler mercekleridir. Bu mercekler
hareketlidir. Objektiflerde farklı büyütmelerde olabilir.
b. Mikroskop kolu:
Kol kısmı mikroskop tüpüne desteklik eder. Mikroskop taşınmasında kol kısmı kullanılır. Kol
kısmıyla mikroskop dik olarak tutulur ve taban kısmı diğer el ile desteklenir.
c.Revolver:
Üzerinde objektiflerin bulunduğu döner sistemdir. Bu sistem sayesinde objeye uygun objektif,
el ile hareket ettirilerek seçilir.
d. Maşa:
Objenin mikroskop tablasına tutturulmasını sağlamaya metal yapıdır.
e. Mikroskop tablası:
Örneklerin yerleştirildiği tabladır.
f. Kondansör:
Tablanın hemen altında bulunur. Bu kısım aynadan ya da lambadan gelen ışığın örnek üzerine
yoğunlaşmasına yarar.
g. Diyafram:
Örnekten geçen ışık ışınları göze ulaşarak retina üzerinde görüntünün oluşmasını sağlarlar.
Burada ışığın yeterli olması da çok önemlidir. Işığın şiddeti diyafram ile ayarlanır. Fotoğraf
makinelerindeki diyafram gibi burada da ışığın geçebileceği alanın küçültülüp, büyültülmesi
söz konusudur.
h. Makro ve Mikrovida:
Büyütme sırasında cismin görülebilmesi için mercek ile aralarında belli bir uzaklık
bulunmalıdır, buna çalışma uzaklığı denir. Çalışma uzaklığının ayarlanmasıyla da çalıştığınız
objenin net görünmesini sağlarsınız. Çalışma uzaklığının ayarlanması gövde üzerinde bulunan
makro ve mikrovida ile yapılır. Çalışma uzaklığı ayarlamada makrovida kaba, mikrovida ise
ince ayar sağlar. Bu ayarlama sırasında objektif ile preperatın arasındaki çalışma uzaklığına çok
dikkat edilmeli, preperatın ve objektifin zarar görmemesine özen gösterilmelidir.
i. Mikroskop ayağı:
Mikroskobun zemine oturmasını sağlayan kaide kısmıdır. Sağlıklı bir çalışma için lütfen
mikroskobunuzu sabit bir alana yerleştiriniz ve kaymasını engelleyiniz.
2. Optik Kısımlar
a. Oküler:
Oküler mikroskobun göz ile bakılan kısımlarında yer alan mercekler dizisidir. Oküler sayısına
göre iki mikroskop çeşidi vardır.
· Monoküler mikroskop: Bir adet okülere sahip mikroskop
· Binoküler mikroskop: İki adet okülere sahip mikroskop
Birçok binoküler mikroskopta gözler arasındaki mesafeyi ayarlamak mümkündür. Okülerlerin
içeri ya da dışarı doğru hareket etmelerini sağlayacak mekanizmaları vardır. Farklı
mikroskopların, okülerleri farklı büyütmeye sahip olabilir. Oküler mikroskop yuvasındaki
yerinden çıkarılarak büyütme gücü okunabilir. İncelenen nesneyi ölçmeye uygun mikrometrik
oküler veya nesneyi belirtmeye yarayan oklu okülerler de vardır.
b. Objektif:
Dönebilir bir başlık (revolver) üzerine monte edilmiş mikroskop tüpü üzerinde üç ya da dört
adet objektif bulunur. Her bir objektif çalışma sırasına göre “klik” sesi duyulana kadar çevrilir.
Objektiflerin üzerinde büyütme güçleri yazılmıştır. Objektifler üzerlerinde yazılı olan büyütme
gücüne göre isim alırlar ve her mikroskopta farklı büyütme gücüne sahip olabilirler.
Taramalı güç ....... 4X
Düşük güç ............10X
Yüksek güç ........... 40X
İmmersiyon .............. 100X
c. Işık Kaynağı:
İki değişik ışık kullanılabilir.
· Ayna ile ışık doğal olarak ya da bir lambadan objeye yansıtılır. Işık yoğunluğundaki
değişmeler nedeniyle doğal ışık fazla tercih edilmez.
· Doğrudan mikroskoba monte edilmiş bir ışık kaynağı kullanılır.
Rezolüsyon
Bir merceğin rezolüsyon gücü, en yakın mesafede bulunan iki cismin hayallerini ayırt etme
yeteneğidir. Bu güç merceğin açıklık sayısı ve ışığın dalga boyuna bağlıdır. Görünen ışığın
dalga boyu 4000-7000 Aº’dür. Adi ışık mikroskobunun rezolüsyon gücü beyaz ışığın dalga
boyunun 1/3'ü kadar olup yaklaşık 2000 Aº = 0,2 mikron'dur. Bundan daha küçük cisimler adi
ışık mikroskobunda görülemezler. Dalga boyu daha küçük olan UV ışınlan ile 2-3 kez, dalga
boyu çok daha kısa olan elektronların kullanıldığı elektron mikroskoplarında ise 100 kez daha
fazla rezolüsyon elde edilir [3].
Mikroskop Çeşitleri
Faz-Kontrast Mikroskobu
stereoskop
Elektron Mikroskobu
Scanning Elektron Mikroskobu
Transmission Elektron Mikroskobu
floresan Mikroskobu
-Mikroskobun Kullanılması:
Mikroskop, mikroskop kolu kendimize doğru olmak üzere konarak yerinden oynatılmamasına
özen gösterilir. Döner tabla (revolver) çevrilerek en küçük objektif mikroskop tablası deliğinin
üzerine getirilir.Mikroskoba monte edilmiş ışık kaynağı açılır. Preparat, mikroskop tablası
açıklığının ortasına gelecek şekilde tablanın üzerine konur. Mikroskop tüpü, makrovidayı
çevirerek objektif ile preparat arasında çok küçük bir uzaklık kalıncaya kadar aşağıya indirilir.
Göz tekrar okülere getirilerek ve makrovida çevrilerek görüntüyü görene dek tüp yukarı doğru
kaldırılır. Eğer görüntü elde edilemez ise o zaman objenin görüntü alanının dışına çıktığı
düşünülmelidir. Bu durumda preparat hareket ettirilerek cismin objektif alanının içine girmesi
sağlanır. Büyük objektife geçildikten sonra sadece mikrovida kullanılır, makrovida kesinlikle
kullanılmaz[3].
-Mikroskobun bakımı:
Okülerde, objektiflerde veya ışık kaynağında görüntünün netliği çevreden gelen tozlarla ve
temas ile bozulabilir. Bu nedenle çalışmaya başlamadan önce mutlaka mikroskobun mercekleri
yumuşak bir bez ile temizlenir. En ideal temizleyici lens paper veya ksilola batırılmış gazlı
bezdir.
- Mikroskop Kullanırken Kesinlikle Uyulması Gereken Kurallar:
1. Mikroskop her zaman iki elle tutulmalıdır.
2. Kullanılacağı zaman dikkatlice kutusundan çıkarılarak dengeli durup durmadığı kontrol
edilmelidir.
3. Mercekler hiçbir zaman ellenmemelidir.