Azərbaycan Respublikası Səhiyyə Nazirliyi kollegiyasının 29 mart 2010-cu IL tarixli
MPR aparılması zamanı yaranan səhvlərin mənbəyi
Yüklə 224,21 Kb. Pdf görüntüsü
|
- Bu səhifədəki naviqasiya:
- MPR aparılması zamanı yaranan səhvlərin mənbəyi
- Qeyd
- Kəmiyyət testləri
- İmmunoferment analizi (İFA) və ya Enzyme-linked Iimmunosorbent Assay (ELISA) (C)
- Klassik variant ►
- Tutma variantı
24
►
istifadədən əvvəl mütləq lazımı dərəcədə qarışdırılmalıdır. ►
Emulsiyanın bakterial çirklənməsi. ►
Plazmanın və qan zərdabının, antigenin və onun emulsiyasının, məhlulların saxlama və istifadə müddətinin pozulması. ►
planşetdən istifadə edilməsi. Qeyd: Yuxarıda göstərilmiş səhvlər reaksiyanın yalançı mənfi və həmçinin yalançı müsbət nəticə verməsinə səbəb ola bilər. TREPONEM TESTLƏR Treponem testlərdə treponem mənşəli patogen solğun treponem antigenindən istifadə edilir. Treponem testlər qeyri-treponem müayinə testlərinin nəticələrini təsdiqləmək üçün aparılır (D). Xəstəliyin az yayıldığı populyasiyalarda onlardan skrininq üçün istifadə edilə bilər, belə ki, İFA-nın avtomatlaşdırılmış metodu mövcuddur. Treponem reaksiyalara bunlar aiddir: ►
►
passiv hemaqlütinasiya reaksiyası (PHA) və ya onun modifikasiyası TPHA (D) ►
solğun treponemin immobilizasiya reaksiyası ►
İFR (immunoflüoressensiya reaksiyası) ►
immunoblottinq və yeni test – xromotoqrafik zolaqlardan istifadə (müalicə yerində analiz) Treponem testlərin şəksiz üstünlüyü onların yüksək həssaslığı və xüsusilə də spesifikliyidir. Lakin bu reaksiyalardan aparılan müalicənin effektivliyinə nəzarət üçün istifadə edilmir, çünki adekvat müalicədən sonra da bu reaksiyalar ömür boyu müsbət qalır. Treponem və qeyri-treponem testlər frambeziya və pinta kimi qeyri- zöhrəvi treponematozlarda da müsbət nəticə verə bilər. Kəmiyyət testləri Hətta müalicə düzgün aparıldıqda belə treponem anticisimlər qan zərdabında uzun illər qalır. Titrin uzun aylar və ya illər ərzində qalxıb-düşməsi xəstəliyin aktivliyini əks etdirmir. Buna görə də spesifik anticisimlərin titrinin təyini diaqnostik əhəmiyyət kəsb Klinik protokol Azərbaycan Respublikası Səhiyyə Nazirliyinin İctimai Səhiyyə və İslahatlar Mərkəzində hazırlanmışdır.
25 etmir. Belə qəbul edilmişdir ki, sensiblizə olunmuş eritrositlər 1:80 durulaşmasında aqqlütinasiya etdikdə TPHA müsbət hesab olunur. Aqqlütinasiya daha kiçik durulaşdırmalarda müşahidə edildikdə, testin nəticəsi mənfi sayılır.
Reaksiyanın prinsipi polisterol planşetin oyuqlarında sifilisli xəstənin anticisimləri ilə antigenin qarşılıqlı təması nəticəsində immun komplekslərin əmələ gəlməsi və daha sonra uyğun substrat – xromagen əlavə edilməklə onların rəngli reaksiya vasitəsi ilə aşkar olunmasına əsaslanıb. İFA üçün istifadə olunan spesifik antigenlər müxtəlif mənbəli ola bilərlər. ► Ultrasəslə işlənmiş: antigenlər T.pallidum hüceyrələrinin ultrasəslə zədələnməsindən alınır
Peptidlər: T.pallidumun antigen zülalları kimyəvi sintez yolu ilə əldə edilir. İFA-nın bir neçə variantı işlənib hazırlanmışdır: Klassik variant ► İmmunoloji planşet oyuğunun iç səthini solğun treponem antigeni ilə sensibilizə edirlər.
Tədqiq olunan zərdab oyuqlara əlavə edildikdə spesifik anticisimlər immun kompleksləri yaradır, onlar bufer məhlulu ilə yuyulduqdan sonra da birləşmiş şəkildə qalırlar. ► Reaksiyaya, insan immunoqlobulinlərinə qarşı fermentlə nişanlanmış anticisimlərdən ibarət olan konyuqat əlavə edilir.
Mürəkkəb immun kompleksin təkrar buferlə yuyulmasından sonra, hidrogen-peroksid əlavə edilir və oksigenin təsiri ilə rəng dəyişir. ► Reaksiya mühitin rənginin tündlüyü antitreponemal anticisimlərin miqdarı ilə düz mütənasibdir, bunu spektrofotometr vasitəsilə ölçmək mümkündür. Tutma variantı Əsasən müxtəlif sinifdən olan anticisimlərin aşkar edilməsində istifadə olunur. Klinik protokol Azərbaycan Respublikası Səhiyyə Nazirliyinin İctimai Səhiyyə və İslahatlar Mərkəzində hazırlanmışdır.
26 ► İmmunoloji planşetin oyuqlarının səthi insan immunoqlobulinlərin müəyyən sinfinə qarşı (məs: İgM, İgG, İgA) anticisimlərlə sensibilizə edilir. ►
sensibilizə olunmuş anticisimləri ilə birləşirlər. ►
İmmobilizə olunmuş immunoqlobulinlərin arasında spesifik anticisimlərin mövcudluğu ferment konyuqatı ilə solğun treponem antigeninin əlavə olunması nəticəsində müəyyən edilir. ►
Reaksiyanın nəticəsi xromogen substratın əlavə edilməsi vasitəsilə vizual olaraq müəyyən olunur. İFA-nın nəticələri avtomatik olaraq optik sıxlıqla müəyyən edilir. İFA-nın hər bir qoyuluşunda optik sıxlığın kritik əhəmiyyəti və “boz zona” müəyyən edilir. “Boz zona” kritik optik sıxlığın ±10%
hüdudlarında yerləşən interval hesab olunur. Tədqiq olunan nümunə o zaman müsbət sayılır ki, optik sıxlıq boz zonadan yüksəkdə yerləşir, şübhəli olduqda boz zona həddində, mənfi olduqda isə boz zonadan aşağı olur. Qeyd: Treponem İFA testləri, yalnız keyfiyyət testləri kimi qiymətləndirilməlidir. Passiv hemaqqlütinasiya reaksiyası (PHA) və ya Treponema pallidum hemaqqlütinasiya reaksiyası (TPHA) ►
Sifilisli xəstələrin qan zərdabındakı antitreponem anticisimlərin solğun treponem antigenləri ilə sensibilizə olunmuş heyvan eritrositləri ilə təması nəticəsində, eritrositlərin gözlə görünən aqqlütinasiyası baş verir. ►
test eritrositləri – patogen solğun treponem antigenləri ilə sensibilizə edilmiş heyvan eritrositləri, nəzarət üçün eritrositlər, durulaşdırma üçün bufer məhlulu, müsbət və mənfi sınaqlar, reaksiya aparmaq üçün 96 oyuqlu immunoloji planşetlər. ►
olunan qan zərdabı (plazmadan istifadə etməməli) və test eritrositləri əlavə edilir. Pasiyentin zərdabında olan spesifik anticisimlərin solğun treponem antigeni ilə təması nəticəsində yaranan birləşmə tədricən dibə çökür və oyuğun dibində “çevrilmiş çətirə” bənzər xarakterik şəkil yaratmış olur. Reaksiyaya vizual olaraq 60-120 dəqiqə sonra qiymətləndirilir. Klinik protokol Azərbaycan Respublikası Səhiyyə Nazirliyinin İctimai Səhiyyə və İslahatlar Mərkəzində hazırlanmışdır. Yüklə 224,21 Kb. Dostları ilə paylaş:
|