6
Chișinău. 2014; Simpozionul Știinţific Internaţional „40 ani de învăţământ superior
medical veterinar în Republica Moldova, Chişinău, 2014; Simpozionul Ştiinţific
Internaţional Cluj-Napoca, 2014; Simpozion internațional consacrat jubileului de 75 de
ani ai profesorului universitar Andrei Munteanu, Chișinău, 2014; Международная
научно-практическая конференция Геологические и биоэкологические проблемы
Северного Причерноморья, г.Тирасполь, 2014; 24
th
International Congress the
Hungarian Association for Buiatrics, Budapest, 2014; 13
th
International Symposium
“Prospects for the 3
rd
Millennium Agriculture”, 25
th
– 27
th
of September 2014, Cluj-
Napoca, Romania și la Simpozionul Știinţific Internaţional Protecţia Plantelor –
realizări şi perspective, Chișinău, 27-28 octombrie 2015.
Publicaţiile la tema tezei. La subiectul tezei au fost publicate 21 de lucrări
ştiinţifice, inclusiv: 2 articole în reviste recenzate, 9 lucrări fără coautor, 10 rapoarte la
conferinţe ştiinţifice naționale și internaționale.
Volumul şi structura tezei. Materialele tezei sunt expuse pe 167 de pagini de text și
cuprind adnotări în limba română, rusă şi engleză, introducerea, reviul literaturii,
rezultatele investigaţiilor expuse în 5 capitole, concluziile generale, recomandările şi
anexele. Bibliografia conţine 187 de surse. Conţinutul tezei este ilustrat de 50 de tabele,
32 de figuri și 48 de fotografii.
Cuvintele-cheie: Amphibia, Ranidae, helmintofaună, monoinvazii, poliinvazii.
1. STUDIU PRIVIND BIOLOGIA, ECOLOGIA, ETOLOGIA ȘI
HELMINTOFAUNA RANIDELOR VERZI
Materialul expus în acest capitol constituie o sinteză a publicaţiilor ştiinţifice din
ţară şi de peste hotare (tratate, monografii, manuale, articole ştiinţifice, ghiduri,
recomandări, opinii ş.a.) referitoare la particularitățile biologiei, ecologiei și etologiei
ranidelor verzi, diversitatea și tipurile de cicluri de dezvoltare ale helmintozelor la
amfibieni, precum și nivelul de infestare în dependenţă de factorii intrinseci și
extrinseci.
2. MATERIALE ŞI METODE DE INVESTIGARE
În acest capitol este descrisă aria de studiu, metodele de colectare, determinare și
de diagnosticare a helminților ranidelor verzi.
La baza tezei de doctorat stau rezultatele cercetărilor ranidelor verzi efectuate în
perioada anilor 2013-2015. Investigațiile ranidelor verzi, capturate din 12 habitate
acvatice, au fost realizate atât în teren (1 350 de specimeni), cât și în condiții de
laborator (347 de specimene de la care s-au colectat 3726 de exempare de helminți), în
laboratorul de Parazitologie și Helmintologie al Institutului de Zoologie al AȘM.
Determinarea ranidelor verzi (Rana ridibunda, R. lessonae, R. esculenta) s-a
efectuat prin analiza și prelucrarea a 15 parametri și 9 indici morfologici, precum și
unele caracteristici ale coloritului după diverși autori [12, 38]. Măsurările lungimii
corpului au fost efectuate cu ajutorul șublerului, cu precizia de 0,05 mm. Masa
specimenilor a fost evaluată cu ajutorul cântarului electronic „Pocket Scale MH–500”
cu precizia de 0,1g.
Determinarea densității și efectivului populațiilor de ranide verzi a
fost realizată conform metodei itinerarului (1 146 de indivizi, inclusiv 657 de ind. de
R.ridibunda, 276 de ind. de
R. lessonae și 213 ind. de
R. esculenta) și prin metoda
parcelelor de control (437 de indivizi, inclusiv la specia R. ridibunda – 110 masculi și 81 de
femele, la R. lessonae – 96 și 56; la R. esculenta – 56 și 38.). Prolificitatea a fost evaluată
7
prin analiza unui eşantion de ouă, iar prolificitatea absolută prin metoda de estimare
directă (25 de femele, 5 ponte de
R.ridibunda) și volumetrică [23, 48].
Dezvoltarea embrionară a fost realizată prin examinarea sub lupa binoculară a 560
de ouă ale ranidelor verzi, iar dezvoltarea larvară – prin capturarea și studierea larvelor.
Comportamentul reproductiv s-a studiat prin metoda observaţiilor directe de durată în
condiţii de teren.
Investigațiilor helmintologice au fost supuși 347 de indivizi (239 de indivizi ai
speciei R.ridibunda, dintre care: 125 de masculi, 71 de femele, 25 de larve și 18
juvenili; 60 de indivizi ai speciei R. Lessonae, dintre care: 42 de masculi, 10 femele și 8
juvenili; 48 de indivizi ai speciei R.esculenta, dintre care: 31 de masculi, 11 femele și 6
juvenili).
Analiza helmintologică s-a realizat conform metodei standard propusă de K.I.
Skrjabin, care implică examinarea tuturor organelor interne ale animalului [34].
Cercetările helmintologice ale organelor paranhimatoze s-au efectuat cu ajutorul
compresoriilor, iar a tractului digestiv – prin spălarea succesivă [34]. Colectarea,
fixarea, determinarea şi prelucrarea materialului helmintologic s-au efectuat după
metodele propuse de diverși autori [18, 24, 26, 31, 33, 37].
Nematodele pentru fixare au fost supuse unui proces termic special, prin care s-a
realizat simultan devitalizarea și păstrarea integrității structurale a corpului [8].
Trematodele, după fixarea lor în alcool de 70
o
C, în scopul determinării, s-au
colorat cu soluție de acid boric și carmin după Grenahera. Diferențierea organelor s-a
efectuat cu soluție de acid clorhidric (HCl) de 1% diluat cu apă distilată și soluție
amoniacală de 1%, ori helminții s-au transferat în alcool cu concentrații crescânde de la
70
o
C la 100
o
C după Mayera.
După colectare, fixare și prelucrare montarea materialului helmintologic s-a
efectuat cu ajutorul inelelor de parafină [8]. Determinarea materialului helmintologic s-
a efectuat după Рыжиков К.М., Шарпило В.П., Шевченко Н.Н., 1980 [31].
Morfologia trematodelor, nematodelor și a acantocefalelor a fost studiată pe baza
preparatelor totale la microscopul „Novex Holland B seriesˮ cu obiectivele 20-40 şi
ocularul WF 10X DIN/20MM și ZEISS AXIO Imager.A2.
Pentru a cuantifica caracteristica de contaminare cu helminţi s-a folosit indicile de
intensivitate (II, exemplare) și extensivitate (EI, %) [14]. Toţi helminţii, în conformitate
cu indicile de intensitate sau extensivitate la amfibieni, au fost grupaţi în următoarele
categorii: dominante (EI>70%); subdominante (EI - 50-69%); obişnuite (EI -30-49 %);
rare (EI - 10-29%) și sporadice (EI <10%) [28].
Pentru stabilirea veridicității datelor au fost folosite metode de analiză matematică
și statistică prin utilizarea pachetului de programe BIOSTAT, versiunea 1.0 elaborată la
Catedra de Zoologie a USM de către academicianul Ion Toderaș și Statistica Workbook
7, iar interpretarea schematică a rezultatelor obținute s-a efectuat utilizând programul
Corel DROW Graphics Suite X4. Toate figurile și fotografiile incluse în lucrare sunt
originale.
3. PARTICULARITĂȚILE BIOLOGO-ECOLOGICE ȘI COMPORTAMENTUL
RANIDELOR VERZI ÎN ECOSISTEMELE REPUBLICII MOLDOVA
3.1. Influența factorilor ecologici asupra morfologiei, cromației și fenologiei
ranidelor verzi. Potrivit analizei morfometrice a ranidelor verzi din Codrii Centrali, am
stabilit că conform celor 15 parametri și 9 indici biometrici utilizați, speciile în cauză se