Ammonifikáció mérésére szolgáló labor kisérlet

Ammonifikáció mérésére szolgáló labor kisérlet

• Ammonifikáció mérésére szolgáló labor kisérlet

• Ammonifikáció fontossága:

• Ökoszisztémák nitrogén ellátását ez a folyamat biztosítja a nitrogén fixálás mellett

• Ammónia meghatározáson alapszik a módszer, miután a minta 3 órán át volt 30°C-on inkubátorban argininnel.

• Centrifuga

• Centrifugáláshoz alkalmas lombik (12 ml)

• 30 °C-ra állítható inkubátor

Agrinin oldat

• Agrinin oldat

• 100 mg L-agrinin-t feloldani 30 ml desztillált vízben, 50 ml-re feltölteni

• Kálium-klorid

• 149 g kálium-kloridot feloldani desztillált vízben, és 1000 ml-re feltölteni

• Fenolát oldat

• 2 g fenolátot feloldani desztillált vízben és 100 ml-re feltölteni

• Nitroprusszid-nátrium oldat

• 50 mg nitroprusszid-nátriumot feloldani 900 ml desztillált vízben, majd feltölteni 1000 ml-re

• NaOH/NaOCl oldat

• 5 g NaOH-t és 25 ml NaOCl feloldunk desztillált vízben, majd 1000 ml-re kiegészítjük

• Ammónia standard oldat I.

• 3,82 g NH4Cl-t feloldani desztillált vízben, majd 1000 ml-re kiegészíteni

• Ammónia standard oldat II.

• Az I. jelű standardból 10 ml-t kell hígítani 1000 ml-re desztillált vízzel

A mérés előtti 24 órán hagyjuk a talajmintát szobahőmérsékleten

• A mérés előtti 24 órán hagyjuk a talajmintát szobahőmérsékleten

• Körübelül 2 g mintát mérjünk be 6 db centrifugacsőbe, lazán zárjuk le őket és helyezzük az inkubátorba 15 percre 30°C-on.

• 3 lombikba mérjünk be 0,5 ml-t csepegtetve az arginin oldatból és helyezzük ismét az inkubátorba 3 órára 30°C-on.

A másik 3 lombikhoz adjunk 0,5 ml desztillált vizet, azonnal tároljuk -20°C-on.

• A másik 3 lombikhoz adjunk 0,5 ml desztillált vizet, azonnal tároljuk -20°C-on.

• 8 ml KCl oldatot adjunk a mintákhoz, zárjuk le a lombikokat és 30 percig rázassuk.

• Centrifugáljuk a mintákat 5-10 percig.

• Centrifugálás után a felülúszó folyadékból 0,5 ml-t kimérünk és hozzáadunk:

• 1,5 ml KCl-t,
• 1 ml-t a fenolát oldatból
• 0,5 ml-t nitroprusszid-nátrium oldatból és
• 0,5 ml-t a NaOH/NaOCl oldatból.

Ismét az inkubátorba helyezzük a mintákat 30 percre 30 °C-on.

• Ismét az inkubátorba helyezzük a mintákat 30 percre 30 °C-on.

• A minták optikai denzitását mérjük 630 nm-en KCl vak mintával szemben.

Pipettázzunk 0; 0,5; 1; 2,5; és 4 ml-t a II. számú standard oldatból 10 ml-es mérőlombikba, majd egészítsük ki 10 ml-re KCl oldattal.

• Pipettázzunk 0; 0,5; 1; 2,5; és 4 ml-t a II. számú standard oldatból 10 ml-es mérőlombikba, majd egészítsük ki 10 ml-re KCl oldattal.

Korrekció után az értékek a következő összefüggés alapján számíthatóak:

• Korrekció után az értékek a következő összefüggés alapján számíthatóak:

• NH4-N (µg g-1 dwt h-1) =

• (NH4-N (µg ml-1) x 4.25) / (t x dwt)

• t = inkubációs idő órában
• dwt = 1 g nedves talaj száraz tömege

Alef K. and Nannipieri P. (Editors): Methods in Applied Soil Microbiology and Biochemistry, Academic Press Limited, London, 1995

• Alef K. and Nannipieri P. (Editors): Methods in Applied Soil Microbiology and Biochemistry, Academic Press Limited, London, 1995